"CAL-12T Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
CAL-12T Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi)）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分
CAL-12T Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
D283-MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
CAL-12T Cell:人肺癌細(xì)胞系
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
HOP62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
T.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細(xì)胞、H1838細(xì)胞、KNS81細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
Caco 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM-L細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞、FRO細(xì)胞
CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
CAL-12T Cell:人肺癌細(xì)胞系
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
LM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞、149PT細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
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