"COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞
H-2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞
NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細(xì)胞、SW 839細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
U-343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
NCIH524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞、Kit225細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞
SK MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細(xì)胞、NP69細(xì)胞、HREC細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD 1細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
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關(guān)鍵字： COV362 Cell:人卵巢癌細(xì)胞系
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