"KP-N-YN Cell:人平滑肌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KP-N-YN Cell:人平滑肌細胞系
細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OCI-AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
REC 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
細胞生長特性：貼壁生長
KP-N-YN Cell:人平滑肌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
KP-N-YN Cell:人平滑肌細胞系
KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
KP-N-YN Cell:人平滑肌細胞系
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
NCI-H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細胞、SUM190細胞、KRC/Y細胞
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