"NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Uhth-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞
H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞
32D CL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
SW-962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2126細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞、DrG細(xì)胞
Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
KNS62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK-2細(xì)胞、AML12細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞
Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
HCT 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
NCI-H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞、H-441細(xì)胞
LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
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關(guān)鍵字： NCI-H2030 Cell:人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
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