"Calu-6 Cell:人肺退行性癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
CAL851細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA 47細(xì)胞、SNU216細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化20分鐘。1:2。5-6天長滿。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細(xì)胞系
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-442A細(xì)胞、C 6細(xì)胞、OC316細(xì)胞
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞
Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
MA-782細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞
NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞
HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
ABE8.1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細(xì)胞系
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
GDM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
C4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞
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