"SPC-A1 Cell:人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SPC-A1 Cell:人肺腺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
SPC-A1 Cell:人肺腺癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
SPC-A1 Cell:人肺腺癌細胞系
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
WM451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
Panc02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
SPC-A1 Cell:人肺腺癌細胞系
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、COV-362細胞、EFM192A細胞
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