"JHH-2 Cell:人肝癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:肝癌;腹水轉(zhuǎn)移;男性
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
JHH-2 Cell:人肝癌細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
細胞生長特性:貼壁
JHH-2 Cell:人肝癌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
JHH-2 Cell:人肝癌細胞系
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
L929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
CAMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
801-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
SW-1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
NALM-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細胞、MLMA細胞、SF17細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
JHH-2 Cell:人肝癌細胞系
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
EoL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、SK-MEL-MeWo細胞、HCT-8細胞
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