"SN4741 Cell:小鼠多巴胺能神經(jīng)細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：多巴胺能神經(jīng)細胞
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
CCRF.CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SN4741 Cell:小鼠多巴胺能神經(jīng)細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
細胞生長特性：貼壁
SN4741 Cell:小鼠多巴胺能神經(jīng)細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
Walker-Ca.256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
SN4741 Cell:小鼠多巴胺能神經(jīng)細胞系
CCRF.CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
ID8/MOSEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞
SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
A2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
GM02131A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
SN4741 Cell:小鼠多巴胺能神經(jīng)細胞系
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細胞、ME180細胞、MDAPCa-2b細胞
KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細胞、JROECL 21細胞、MESSADX5細胞
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