"NCI-H250 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：小細胞肺癌；男性
GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H250 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
細胞生長特性：半貼壁
NCI-H250 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
JCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
NCI-H250 Cell:人小細胞肺癌細胞系
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
GLC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
PLA 802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
CCD18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
MV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
NCI-H250 Cell:人小細胞肺癌細胞系
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
Panc3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES-2細胞、H2198細胞、SK-MES細胞
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