"LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肺鱗癌；女性
OVCAR.3細胞系相關產(chǎn)品：Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
J82COT細胞系相關產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
UPCISCC154細胞系相關產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
HCC1833細胞系相關產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
293S細胞系相關產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
50.B1細胞系相關產(chǎn)品：TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
H2141細胞系相關產(chǎn)品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
Hs 766細胞系相關產(chǎn)品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞
SW 839細胞系相關產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
細胞生長特性：貼壁
LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
RF/6A細胞系相關產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
Natural Killer-92細胞系相關產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
RetroPack PT67細胞系相關產(chǎn)品：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
TE-85細胞系相關產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
P30/OHK細胞系相關產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
HepG2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
H.Ep. #2細胞系相關產(chǎn)品：H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
MBT2細胞系相關產(chǎn)品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
SUP T1細胞系相關產(chǎn)品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Case 3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
M2-10B4細胞系相關產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
AQ-Mel細胞系相關產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
MDA MB 231細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
MDA MB 231細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
SW 480細胞系相關產(chǎn)品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
Hs578Bst細胞系相關產(chǎn)品：RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
TE15細胞系相關產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
OVMANA細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
HFT 8810細胞系相關產(chǎn)品：CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
RL-952細胞系相關產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
NCL-H548細胞系相關產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
4175細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
TE-10細胞系相關產(chǎn)品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
H-2029細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
CSQT-2細胞系相關產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
TE 671細胞系相關產(chǎn)品：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Nb 2細胞系相關產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
MOLM-13細胞系相關產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
EC-GI-10細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
MDA-MB-453細胞系相關產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
VMRC-LCD細胞系相關產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
SKMEL24細胞系相關產(chǎn)品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
BT-20細胞系相關產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
RCC_7860細胞系相關產(chǎn)品：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
H-522細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
A-172MG細胞系相關產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
COS1細胞系相關產(chǎn)品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
Molm 13細胞系相關產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
786-O細胞系相關產(chǎn)品：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
UCW 100細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
293 c18細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
KMB17細胞系相關產(chǎn)品：Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
D283 Med細胞系相關產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
EL4細胞系相關產(chǎn)品：MDCK.2細胞、MKN-28細胞、CT26細胞
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關鍵字： LOU-NH91 Cell:人肺鱗癌細胞系
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