"HuLEC-5a Cell:人肺微血管內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:肺微血管;內(nèi)皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HuLEC-5a Cell:人肺微血管內(nèi)皮細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
細胞生長特性:貼壁
HuLEC-5a Cell:人肺微血管內(nèi)皮細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
HuLEC-5a Cell:人肺微血管內(nèi)皮細胞系
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
NCIH1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞
Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細胞、67NR細胞、A549細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
SNU739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
REC 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
alpha TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
KYSE 410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
HuLEC-5a Cell:人肺微血管內(nèi)皮細胞系
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、Panc10.05細胞、ECC-1細胞
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