"RIN-14B Cell:大鼠胰島素瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:胰島素瘤;雄性;NEDH
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RIN-14B Cell:大鼠胰島素瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
細胞生長特性:貼壁
RIN-14B Cell:大鼠胰島素瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
ECC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
NCI-H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
RIN-14B Cell:大鼠胰島素瘤細胞系
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
UM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
LNCaP-C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6細胞、QGY細胞、HT29細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
RIN-14B Cell:大鼠胰島素瘤細胞系
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
MCA 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
SF-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、SKLMS-1細胞、alpha-TC1-6細胞
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