"ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞產(chǎn)生高水平的黏液素MUC-1 mRNA,低水平的MUC-2 mRNA,但不表達(dá)MUC-3基因;表達(dá)雌激素受體。
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細(xì)胞,易生長的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞,在其生長旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細(xì)胞,在其生長速度慢的時(shí)候,會好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候,或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長旺盛的時(shí)候,玻璃瓶則相對會好一點(diǎn)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞
ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
NCI-H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
JIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞
NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
HCC1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞、SKO3細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
HRC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞
NCIH596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞、CL1細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞
SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞
"
關(guān)鍵字: ZR-75-1 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。