"NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:NR8383(正常大鼠,1983年8月3日)來源于肺灌洗時(shí)的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個(gè)月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個(gè)細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-1,TNFbeta和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGFbeta前體。在博萊霉素刺激下,TGFbe
R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:半貼壁生長
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問題,太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性:巨噬細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
HPaSteC(HPSC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H-10T1/2細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞
CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
LICR-HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB468細(xì)胞、38C-13細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
ZYM-DIEC02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞
kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
NR8383 Cell:大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
NFHIOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞
NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞
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