"DK-MG Cell:人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:膠質(zhì)母細胞瘤;女性 SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞 Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞 CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 DK-MG Cell:人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系 細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞 PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞 U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞 HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞 細胞生長特性:貼壁 DK-MG Cell:人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞 HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞 Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞 RT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞 HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞 NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞 ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞 DK-MG Cell:人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系 NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞 DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞 NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞 NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞 ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞 A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞 SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞 786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 N1E-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞 253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞 MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞 NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞 Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞 ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞 CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞 HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞 MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞 MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞 FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞 NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞 HPaSteC(HPSC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H-10T1/2細胞、MyLa 2059細胞、HEL-92細胞 T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞 U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞 COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞 SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞 NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞 ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞 SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞 QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞 CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞 SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞 HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞 SF 295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞 DK-MG Cell:人膠質(zhì)母細胞瘤細胞系 CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞 Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞 BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞 MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞 HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞 KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞 H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞 HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞 JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、H-2106細胞、D-341 Med細胞 "
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