"LAPC-4 Cell:人前列腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:前列腺癌;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性 HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞 OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞 IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞 NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 LAPC-4 Cell:人前列腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會(huì)對細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測出細(xì)胞株有支原體污染時(shí),該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細(xì)胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會(huì)偏暗紅色,且pH值會(huì)越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí),可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞 T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞 UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞 Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞 PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 LAPC-4 Cell:人前列腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞 H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞 A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞 LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞 HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞 HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞 NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞 LAPC-4 Cell:人前列腺癌細(xì)胞系 ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞 VERO C 1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞 C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞 LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞 SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞 PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞 COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞 NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞 NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞 HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞 ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞 PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞 H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞 MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞 AdHek細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT101細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞 HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞 Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞 Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞 PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞 H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞 NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞 Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞 SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞 ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞 Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞 WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞 HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞 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