"HHL-5 Cell:人胚胎肝細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肝；HPV１６轉化；男性
RAW 264.7細胞系相關產品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
GalK1細胞系相關產品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
H-295R細胞系相關產品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
A-498細胞系相關產品：Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HHL-5 Cell:人胚胎肝細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內應有多少細胞濃度？冷凍管內細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關產品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
143B TK-細胞系相關產品：GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
H-1954細胞系相關產品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
HN6細胞系相關產品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
JVM-2細胞系相關產品：3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
細胞生長特性：貼壁
HHL-5 Cell:人胚胎肝細胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SL1細胞系相關產品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
SK-OV-433細胞系相關產品：KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
RFL-6細胞系相關產品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
Hs 695.T細胞系相關產品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
IMCD-3細胞系相關產品：NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
U-343細胞系相關產品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
SW1417細胞系相關產品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
HHL-5 Cell:人胚胎肝細胞系
LS-411N細胞系相關產品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
LS 174 T細胞系相關產品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關產品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
HUT-28細胞系相關產品：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
P30/OHK細胞系相關產品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
RMC-1細胞系相關產品：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞
RAW 264.7細胞系相關產品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
SCC15細胞系相關產品：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
TU 686細胞系相關產品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
TU 686細胞系相關產品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
CP70細胞系相關產品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
EC109細胞系相關產品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
MonoMac 6細胞系相關產品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
NBL-5細胞系相關產品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
B16-F0細胞系相關產品：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
Tn5 B1-4細胞系相關產品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
253J-BV細胞系相關產品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
NGEC細胞系相關產品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
LAN5細胞系相關產品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
Detroit-562細胞系相關產品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
H-661細胞系相關產品：PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
HECCL-1細胞系相關產品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
RPMI2650細胞系相關產品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
Alexander cells細胞系相關產品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
STO細胞系相關產品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
HT1376細胞系相關產品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
SuDHL 1細胞系相關產品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
HO8910/PM細胞系相關產品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
SHG 44細胞系相關產品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
H727細胞系相關產品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
HS-294細胞系相關產品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
hs 68細胞系相關產品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
VA-ES-BJ細胞系相關產品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞
PaTu 8988s細胞系相關產品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
W256細胞系相關產品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
HRMC細胞系相關產品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
LCLC-103H細胞系相關產品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
LIM-1215細胞系相關產品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
HIEC-6細胞系相關產品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關產品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關產品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
SACC-83細胞系相關產品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
MOLM16細胞系相關產品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
HHL-5 Cell:人胚胎肝細胞系
SK-N-BE2細胞系相關產品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
OE-21細胞系相關產品：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
HUT28細胞系相關產品：COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
RBSMC細胞系相關產品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
138MG細胞系相關產品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
MADB106細胞系相關產品：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞
MDA231-LM2細胞系相關產品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
hTERT-RPE細胞系相關產品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
SJRH-30細胞系相關產品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
HCFB（HCF）細胞系相關產品：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
SW1088細胞系相關產品：P3X63NS1細胞、UMR106細胞、CEF細胞
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