"ETCC007 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:原位導(dǎo)管癌;女性 VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞 SKNSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞、AR41P細(xì)胞 Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞 GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 ETCC007 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻模〖?xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開(kāi)細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi),受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái),又不能太過(guò),一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開(kāi)。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來(lái)洗,洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開(kāi)來(lái)。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開(kāi)來(lái)的時(shí)候,就可以直接吹打下來(lái),但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過(guò)了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了,可以選用此方法。不過(guò)一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞 NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞 SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 ETCC007 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞 OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞 SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞 HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞 NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞 NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞 G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞 ETCC007 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞 HB 611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞 MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞 HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞 ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞 HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞 AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞 UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞 TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞 TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞 CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞 Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞 OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞 GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞 YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞 EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞 IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞 EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞 6-T CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞 CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞 SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞 SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞 16HBEo-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞 RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞 PC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞 3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞 SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞 HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞 SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞 C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞 H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞 KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞 SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞 HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞 SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞 PLC PRF 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116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞 MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞 E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞 LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞 Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞 Hs 940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細(xì)胞、TE10細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞 MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞 C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞 NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H2347細(xì)胞 "
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