"Ishikawa Cell:人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Ishikawa Cell:人子宮內(nèi)膜癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Ishikawa Cell:人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞
Ishikawa Cell:人子宮內(nèi)膜癌細胞系
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
Panc10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
253J-Bladder-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
Ishikawa Cell:人子宮內(nèi)膜癌細胞系
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、SNK-6細胞、HCC78細胞
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