"HBL-100 Cell:人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立,培養(yǎng)出來的細(xì)胞染色體組型在第7代時(shí)就不正常;電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒;Southern轉(zhuǎn)移表明有整合型SV40病毒基因,當(dāng)作正常細(xì)胞。 CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞 UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞 SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞 HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HBL-100 Cell:人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。2.對(duì)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長(zhǎng)得比較好。(可能也是競(jìng)爭(zhēng)很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對(duì)于生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞,易生長(zhǎng)的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在玻璃瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的狀態(tài)會(huì)比一次性相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶?jī)?nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長(zhǎng)得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會(huì)好,對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會(huì)更好。同樣,對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)速度慢的時(shí)候,會(huì)好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候,或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長(zhǎng)旺盛的時(shí)候,玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候,有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞 HEY-A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1395細(xì)胞、SNU520細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞 P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞 NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞 ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) HBL-100 Cell:人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng):1.打開無菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞 IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞 Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞 CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞 Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞 LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞 DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞 HBL-100 Cell:人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系 IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞 NCI-H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細(xì)胞、V79細(xì)胞、H2087細(xì)胞 CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞 CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞 RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞 MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞 Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞 C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞 CCD-18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW 01細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞 EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞 PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞 SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞 HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞 DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞 DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞 NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞 WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞 PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞 KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞 Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞 OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞 S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞 MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞 RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞 EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞 HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞 NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞 3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞 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229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞 RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞 THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞 GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞 Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞 GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞 HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞 Y3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞 RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞 "
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