"HaCaT Cell:人永生化表皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位６２歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽性。
JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細(xì)胞、Mink細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HaCaT Cell:人永生化表皮細(xì)胞系
如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細(xì)胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細(xì)胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細(xì)胞，易生長的細(xì)胞加少一點培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細(xì)胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細(xì)胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細(xì)胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細(xì)胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細(xì)胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復(fù)蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
L929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
HaCaT Cell:人永生化表皮細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
HaCaT Cell:人永生化表皮細(xì)胞系
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
T-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr/S細(xì)胞、624mel細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細(xì)胞、MDA415細(xì)胞、HPAC細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
HaCaT Cell:人永生化表皮細(xì)胞系
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞
B16 melanoma F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細(xì)胞、OKT3細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞
CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-7細(xì)胞、H1792細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
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