"THLE-3 Cell:人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
THLE-3 Cell:人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長(zhǎng)滿
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
THLE-3 Cell:人肝永生化細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
THLE-3 Cell:人肝永生化細(xì)胞系
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
KBM7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
NCI-H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
V 79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs 74 Int細(xì)胞、K 562細(xì)胞、AU-565細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
LLCPK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
SK-MES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞、Simpson細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
THLE-3 Cell:人肝永生化細(xì)胞系
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
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