"MHCC97-H Cell:高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:來源于中山醫(yī)院,用人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H接種裸鼠,進(jìn)行3次肺轉(zhuǎn)移篩選,取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細(xì)胞系 Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞 D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞 DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MHCC97-H Cell:高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系 因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候,有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞 GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞 Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞 MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞 HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) MHCC97-H Cell:高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng):1.打開無菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞 Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞 BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞 CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞 VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞 no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞 CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞 MHCC97-H Cell:高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞 MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞 HCC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞 K7M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞 CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞 MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞 SRS-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞 SGC 7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞 Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞 NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞 OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR20細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞 SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞 D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞 REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞 NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞 hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞 SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞 BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞 HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞 H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞 HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞 TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞 FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞 SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞 IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞 H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞 DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細(xì)胞、C22細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞 IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞 C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞 GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞 NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞 QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞 TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞 PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞 HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞 SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞 CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞 H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞 MHCC97-H Cell:高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系 NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞 NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞 EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞 VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞 IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞 KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞 LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞 WM239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞 CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞 NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞 IOSE-Mar細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞 OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞 "
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