"Calu-1 Cell:人肺腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 HEK293-H細胞系相關產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞 H-676B細胞系相關產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞 LN-382細胞系相關產(chǎn)品:W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞 Panc203細胞系相關產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 Calu-1 Cell:人肺腺癌細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化10分鐘。1:2。3-4天長滿 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 H-9細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞 MEC-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 H1650細胞系相關產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞 MCF-7/AdrR細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞 Hs 683細胞系相關產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞 細胞生長特性:貼壁生長 Calu-1 Cell:人肺腺癌細胞系 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 Hs604T細胞系相關產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞 NUGC3細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞 LIXC-002細胞系相關產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞 SKMEL-31細胞系相關產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 HBL1細胞系相關產(chǎn)品:U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞 SNU869細胞系相關產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞 Calu-1 Cell:人肺腺癌細胞系 LA795細胞系相關產(chǎn)品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞 HEY-A8細胞系相關產(chǎn)品:H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞 NCIH378細胞系相關產(chǎn)品:COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞 NCIH1838細胞系相關產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 CHL-IU細胞系相關產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞 CORL279細胞系相關產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞 SR786細胞系相關產(chǎn)品:NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞 HCC38細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞 Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞 Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞 PLC-8024細胞系相關產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞 CHL-CL-11細胞系相關產(chǎn)品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞 4-1st細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞 H676細胞系相關產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞 RL-952細胞系相關產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞 QGY-7701細胞系相關產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 NH-6細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞 HCC-1937細胞系相關產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞 SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞 RKOE6細胞系相關產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 MonoMac 6細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞 SU-DHL-16細胞系相關產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞 Hs 888.Lu細胞系相關產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞 SU-DHL-6細胞系相關產(chǎn)品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞 NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞 COLO-679細胞系相關產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞 LI7細胞系相關產(chǎn)品:BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞 210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞 BDCM細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞 HS 1.Tes細胞系相關產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞 Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞 NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞 LA 4細胞系相關產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞 Colo-201細胞系相關產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞 H1693細胞系相關產(chǎn)品:PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞 SW1783細胞系相關產(chǎn)品:HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞 SK-BR-3細胞系相關產(chǎn)品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞 ACC-M細胞系相關產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品:SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞 RT4-D6-P2T細胞系相關產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞 HCC70細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞 686LN-M4e細胞系相關產(chǎn)品:HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞 Calu-1 Cell:人肺腺癌細胞系 TGW-I-nu細胞系相關產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 NUGC4細胞系相關產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞 SKNMC細胞系相關產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞 SK-MEL-2-LUC細胞系相關產(chǎn)品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞 SVGp12細胞系相關產(chǎn)品:H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞 HPAEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞 M-20細胞系相關產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞 Scott and White No. 13細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 A375SM細胞系相關產(chǎn)品:PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞 HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞 SK-BR3細胞系相關產(chǎn)品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞 NCIH1623細胞系相關產(chǎn)品:MRC5細胞、NCI-H1238細胞、NCIH1836細胞 "
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