"LoVo Cell:人結腸癌細胞系

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞背景資料：LoVo建自１９７１年，從診斷為結腸腺癌的５６歲男性白人的一個轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結節(jié)建系。癌基因Ｃ-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達呈陽性。癌基因N-myc的表達未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與１０７細胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠２１天后全部成瘤。表達腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-３和CC-４。

RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞

COLO 679細胞系相關產(chǎn)品：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞

P3J.HR1K細胞系相關產(chǎn)品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞

B16-F0細胞系相關產(chǎn)品：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

LoVo Cell:人結腸癌細胞系

細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次

如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞

B-3細胞系相關產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞

Glioma 261細胞系相關產(chǎn)品：A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞

VM Cub 1細胞系相關產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞

MDCK-2細胞系相關產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞

細胞生長特性：貼壁生長

LoVo Cell:人結腸癌細胞系

細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。

細胞形態(tài)特性：上皮樣

CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞

H-1373細胞系相關產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞

LLC1細胞系相關產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞

NCIH520細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞

AD-293細胞系相關產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

SU86.86細胞系相關產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞

TE-7細胞系相關產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞

LoVo Cell:人結腸癌細胞系

MRC-9細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞

ZR75-30細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞

U251-MG細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞

MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞

HRCEC細胞系相關產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞

624mel細胞系相關產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞

MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞

NCI-H2171細胞系相關產(chǎn)品：AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞

SRA01/04 (HLE)細胞系相關產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞

WEHI-231細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞

BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞

Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞

NCIH82細胞系相關產(chǎn)品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞

SaOS-2細胞系相關產(chǎn)品：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞

Hs-281-T細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞

Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞

HEK293A細胞系相關產(chǎn)品：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞

ECC 12細胞系相關產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞

VK2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞

PC-9S1細胞系相關產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞

HBVSMC細胞系相關產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞

A 549細胞系相關產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞

GT38細胞系相關產(chǎn)品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞

3AO細胞系相關產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞

TE 671細胞系相關產(chǎn)品：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞

H-2029細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞

BC-024細胞系相關產(chǎn)品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞

KYSE 450細胞系相關產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

H889細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞

RGC5細胞系相關產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞

NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞

MOLP-8細胞系相關產(chǎn)品：Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞

Hs888T細胞系相關產(chǎn)品：C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞

Rat-2細胞系相關產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞

SUSM1細胞系相關產(chǎn)品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞

Walker 256細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞

U-138MG細胞系相關產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞

UACC-893細胞系相關產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞

H-929細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞

NKL細胞系相關產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞

CAL85-1細胞系相關產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞

HCC-1143細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞

QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞

LoVo Cell:人結腸癌細胞系

Panc-327細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞

Ej138細胞系相關產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞

Metastatic Variant-522細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞

HEC151細胞系相關產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞

T8細胞系相關產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞

HOP-62細胞系相關產(chǎn)品：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞

SKCol1細胞系相關產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞

Turbot Embryonic Cell line細胞系相關產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞

HCC9204細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞

Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞

JURKAT E-6.1細胞系相關產(chǎn)品：MEL細胞、NCI-H2135細胞、HS688AT細胞

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