pHIL-S1載體的詳細(xì)信息如下: • pHIL-S1載體大小8,260 bp,是融合表達(dá)載體。 • 載體構(gòu)建過程中,可供使用的單一限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)為Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I. • 利用PHO1分泌信號肽,分泌表達(dá)蛋白基因。 • 在載體構(gòu)建過程中,你的基因必須保證與信號肽的起始密碼子的讀碼框一致。 • 畢赤酵母中利用HIS4進(jìn)行篩選。 • 為了將基因插入GS115或KM71的AOX區(qū), 使用SacI限制性內(nèi)切酶線性化質(zhì)粒(GS115中產(chǎn)生His+Mut+基因型,KM71中產(chǎn)生His+ MutS基因型) •為了將基因插入GS115或KM71的His4區(qū), 使用Sal I或者Stu I限制性內(nèi)切酶線性化質(zhì)粒(GS115中產(chǎn)生His+ Mut+基因型,KM71中產(chǎn)生His+ MutS基因型) •將基因插入GS115的AOX1區(qū)域,需要使用Bgl II線性化質(zhì)粒 (產(chǎn)生His+MutS基因型)。
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