"HeLa 229:人宮頸癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料:宮頸癌;女性
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HeLa 229:人宮頸癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
NCI-H1668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HeLa 229:人宮頸癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
KYSE 410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、786.O細(xì)胞
MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞
NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
SK Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
H-1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞
Anglne細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞
MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞
KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
HeLa 229:人宮頸癌傳代細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細(xì)胞、SW.620細(xì)胞、AtT20細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
Pt-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
HeLa 229:人宮頸癌傳代細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細(xì)胞、RL95細(xì)胞、BL6細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1048細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞
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