"MuM-2B：人眼脈絡(luò)黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：脈絡(luò)膜黑色素瘤；女性
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MuM-2B：人眼脈絡(luò)黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MuM-2B：人眼脈絡(luò)黑色素瘤傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞、H740細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
MuM-2B：人眼脈絡(luò)黑色素瘤傳代細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
KYSE 410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR7530細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、786.O細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
MuM-2B：人眼脈絡(luò)黑色素瘤傳代細(xì)胞
BT474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-727細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞、MS-751細(xì)胞
Hs 675.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PanC1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、L細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-940細(xì)胞、S16細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
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