"End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料:子宮內(nèi)膜;女性;HPV16轉(zhuǎn)化
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
UCLA-SO-M20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
可以這樣說(shuō),對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了,狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題,可以非??隙ǖ卣f(shuō),你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒(méi)有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的,大家爭(zhēng)取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況把握)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
SNU-739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞、AM-38細(xì)胞
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞、LI7細(xì)胞
K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞、LI7細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細(xì)胞、624mel細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞
NCI-H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH 77細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞
End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代細(xì)胞
TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
Giant Cell Tumor細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞
Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
NCI-H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細(xì)胞、V79細(xì)胞、H2087細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
HCC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、H-220細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA293細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
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關(guān)鍵字: End1/E6E7:人子宮頸內(nèi)膜上皮傳代;
上海弘順生物科技有限公司長(zhǎng)期為高校和科研單位等提供優(yōu)良的科研產(chǎn)品,在生物化學(xué)行業(yè)內(nèi)獲得良好的客戶口碑。目前,公司提供近十萬(wàn)余種科研產(chǎn)品,其中涵蓋化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域。同時(shí),我司不斷拓展產(chǎn)品種類,為用戶提供質(zhì)量更優(yōu)、價(jià)格更實(shí)惠的科研產(chǎn)品。 上海弘順生物科技有限公司 主營(yíng)產(chǎn)品有: 1.生化試劑:上海弘順生物科技有限公司 在上海化學(xué)工業(yè)區(qū)設(shè)有生產(chǎn)研發(fā)基地。目前,我司生化試劑產(chǎn)品已達(dá)60000多種,并呈不斷增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。經(jīng)過(guò)不斷的創(chuàng)新與發(fā)展,上海弘順生物科技有限公司創(chuàng)立了公司自主試劑品牌(品牌:HonSun),為廣大科研工作者提供了高品質(zhì)的實(shí)驗(yàn)試劑。我司生化試劑種類涵蓋氨基酸類、蛋白質(zhì)