pTNF-α-promoter-TA-luc (報告基因質(zhì)粒)
pTNF-α-promoter-TA-luc(報告基因質(zhì)粒)是信裕生物自行研發(fā)的用于檢測TNF-α promoter轉(zhuǎn)錄活性水平的報告基因質(zhì)粒。
pTNF-α-promoter-TA-luc是以信裕生物的pGL6-TA質(zhì)粒為模板,在其多克隆位點插入了human TNF-α的啟動子序列(-991bp~-1bp),可以高靈敏度地檢測human TNF-α promoter的激活水平。
TNF-α(Tumor Necrosis Factor α),中文名為腫瘤壞死因子α,是一種非常重要的炎性細胞因子,在炎性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用,常作為炎癥反應的重要指標。
pGL6-TA是用于在哺乳動物細胞中進行螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)報告基因檢測的新一代質(zhì)粒。該報告基因質(zhì)粒比
Promega公司的pGL3系列有了全面的改進,一方面對于luciferase的編碼進行了改進,確保能更好地在哺乳動物細胞中進行表達,同時對整個質(zhì)粒中所有可以被預測出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點全部進行了適當?shù)耐蛔兲幚恚诒3衷泄δ懿蛔兊那闆r下,使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到最低。
螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。
pTNF-α-promoter-TA-luc質(zhì)粒的主要信息如下:
Minimal TA promoter(pTA)
1033-1055
luc2 reporter gene
1097-2749
SV40 late poly(A)signal
2784-3005
SV40 early enhancer/promoter
3053-3471
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region
3496-4290
Synthetic poly(A)signal
4315-4363
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region
4430-4449
ColE1-derived plasmid replication origin
4687
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region
5451-6348
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site
6443-6596
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region
6545-6564
pTNF-α-promoter-TA-luc質(zhì)粒的圖譜如下:
pTNF-α-promoter-TA-luc的多克隆位點及TNF-α promoter的詳細圖譜如下:
1
GGCCTAACTG
GCTCCTGGGA
GATATGGCCA
CCGGATTGAC
CGAGGACCCT
CTATACCGGT
51
CTCTGAGGAA
TGGGTTACAG
GAGACCTCTG
GGGAGATGTG
GAGACTCCTT
ACCCAATGTC
CTCTGGAGAC
CCCTCTACAC
101
TGGGTAGGAG
AATGTCCAGG
GCTATGGAAG
TCGAGTATGG
ACCCATCCTC
TTACAGGTCC
CGATACCTTC
AGCTCATACC
151
TTAACGAAGA
CAGGGCCATG
TAGAGGGCCC
CAGGGAGTGA
AATTGCTTCT
GTCCCGGTAC
ATCTCCCGGG
GTCCCTCACT
201
AGGACCTCCA
GGTATGGAAT
ACAGGGGACG
TTTAAGAAGA
TCCTGGAGGT
CCATACCTTA
TGTCCCCTGC
AAATTCTTCT
251
CACTGGGGCC
CTGAGAAGTG
AGAGCTTCAT
GAAAAAAATC
GTGACCCCGG
GACTCTTCAC
TCTCGAAGTA
CTTTTTTTAG
301
GAGTTCCTTG
GAAGCCAAGA
CTGAAACCAG
CATTATGAGT
CTCAAGGAAC
CTTCGGTTCT
GACTTTGGTC
GTAATACTCA
351
GAATGAAAGA
AGAAGGCCTG
CCCCAGTGGG
GTCTGTGAAT
CTTACTTTCT
TCTTCCGGAC
GGGGTCACCC
CAGACACTTA
401
GATTTCACTC
CCCGGGGCTG
TCCCAGGCTT
GTCCCTGCTA
CTAAAGTGAG
GGGCCCCGAC
AGGGTCCGAA
CAGGGACGAT
451
GCCTTTCCTG
AGGCCTCAAG
CCTGCCACCA
AGCCCCCAGC
CGGAAAGGAC
TCCGGAGTTC
GGACGGTGGT
TCGGGGGTCG
501
CGCAGGGACC
CAAACACAGG
CCTCAGGACT
CAACACAGCT
GCGTCCCTGG
GTTTGTGTCC
GGAGTCCTGA
GTTGTGTCGA
551
ACCCCGTTTT
CTCTCCCTCA
AGGACTCAGC
TTTCTGAAGC
TGGGGCAAAA
GAGAGGGAGT
TCCTGAGTCG
AAAGACTTCG
601
TCTAGTTCTA
TCTTTTTCCT
GCATCCTGTC
TGGAAGTTAG
AGATCAAGAT
AGAAAAAGGA
CGTAGGACAG
ACCTTCAATC
651
GCCACAGACC
TGGTCCCCAA
AAGAAATGGA
GGCAATAGGT
CGGTGTCTGG
ACCAGGGGTT
TTCTTTACCT
CCGTTATCCA
701
ATGGGGACGG
GGTTCAGCCT
CCAGGGTCCT
ACACACAAAT
TACCCCTGCC
CCAAGTCGGA
GGTCCCAGGA
TGTGTGTTTA
751
CCCAGAAGAC
CCCCCTCGGA
ATCGGAGCAG
GGAGGATGGG
GGGTCTTCTG
GGGGGAGCCT
TAGCCTCGTC
CCTCCTACCC
801
GGTATCCTTG
ATGCTTGTGT
GTCCCCAACT
TTCCAAATCC
CCATAGGAAC
TACGAACACA
CAGGGGTTGA
AAGGTTTAGG
851
GATGGAGAAG
AAACCGAGAC
AGAAGGTGCA
GGGCCCACTA
CTACCTCTTC
TTTGGCTCTG
TCTTCCACGT
CCCGGGTGAT
901
CAGATGAGCT
CATGGGTTTC
TCCACCAAGG
AAGTTTTCCG
GTCTACTCGA
GTACCCAAAG
AGGTGGTTCC
TTCAAAAGGC
951
GATTCTTTCC
CCGCCCTCCT
CTCGCCCCAG
GGACATATAA
CTAAGAAAGG
GGCGGGAGGA
GAGCGGGGTC
CCTGTATATT
-1 BglII HindIII Minimal TA promoter
1001
AGATCTGCAG
AAGCTTAGAC
1051
CCAGCTTGGC
AATCCGGTAC
TGTTGGTAAA
GCCACCATGG
GGTCGAACCG
TTAGGCCATG
ACAACCATTT
CGGTGGTACC
pTNF-α-promoter-TA-luc中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-TA-luc)包括:
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nhe I
Nru I
PaeR7 I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
Rsr II
SnaB I
Spl I
pTNF-α-promoter-TA-luc中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pTNF-α-promoter-TA-luc once)包括:
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3971
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BsiC I
TT`CG,AA
4366
Acc65 I
G`GTAC,C
15
BstB I
TT`CG,AA
4366
Asp718
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
4380
Kpn I
G,GTAC`C
19
ApaL I
G`TGCA,C
4944
Bsa I
GGTCTC 7/11
66
HgiE II
ACCNNNNNNGGT
-1/135209
EcoR I
G`AATT,C
388
Not I
GC`GGCC,GC
5450
Tth111 I
GACN`N,NGTC
661
BstE II
G`GTNAC,C
5477
Sac I
G,AGCT`C
911
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
5552
Bgl II
A`GATC,T
1012
Pvu I
CG,AT`CG
5922
Hind III
A`AGCT,T
1022
Sac II
CC,GC`GG
5946
BsrG I
T`GTAC,A
1588
Bst1107 I
GTA|TAC
6062
Dra III
CAC,NNN`GTG
2244
Xca I
GTA|TAC
6062
Mun I
C`AATT,G
2924
Spe I
A`CTAG,T
6381
BamH I
G`GATC,C
3017
BsmB I
CGTCTC 7/11
6394
pTNF-α-promoter-TA-luc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下:
RVprimer3(6545-6564):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pTNF-α-promoter-TA-luc的全序列信息: D2481 pTNF-α-promoter-TA-luc-seq.txt
包裝清單:
KL-2481-1μg
pTNF-α-promoter-TA-luc (報告基因質(zhì)粒)
1μg
KL-2481-100μg
pTNF-α-promoter-TA-luc (報告基因質(zhì)粒)
100μg
保存條件:
-20℃保存。
注意事項:
本質(zhì)粒未經(jīng)信裕生物書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明:
1. 首次使用1μg包裝的本產(chǎn)品時,請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)??梢酝ㄟ^酶切電泳進行鑒定,或通過測序進行鑒定。
2. 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl,共1ml??梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細胞。
3. pTNF-α-promoter-TA-luc可以用常規(guī)的細胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細胞。檢測時可以采用信裕生物的螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG005/RG006)或雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG027/RG028)。
4. LPS等是常見的可以激活TNF-α轉(zhuǎn)錄的試劑,可以用作pTNF-α-promoter-TA-luc報告基因檢測時的陽性對照。
關鍵字: pTNF-α-promoter-TA-luc (報告基因質(zhì)粒)說明書;pTNF-α-promoter-TA-luc (報告基因質(zhì)粒)廠家
上海康朗生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務確。