檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗豬IFN-γ抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IFN-γ與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。
檢測(cè)類(lèi)型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測(cè)樣本類(lèi)型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗豬IFN-gamma檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。
靈敏度:7.8 pg/mL
檢測(cè)范圍:62.5 - 4,000 pg/mL
回收率范圍:90-116%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
γ干擾素(又稱(chēng)為II型干擾素)是一個(gè)重要的能行使免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子。它因其抗病毒活性而被發(fā)現(xiàn)。γ干擾素通過(guò)抗病毒、抗增殖和免疫調(diào)節(jié)功能在宿主防御中扮演關(guān)鍵角色。在多種類(lèi)型的細(xì)胞中,γ干擾素可誘導(dǎo)細(xì)胞因子的產(chǎn)生和上調(diào)不同的膜蛋白的表達(dá),包括I/II型主要組織相容性復(fù)合體(MHC-I,MHC-II)、Fc受體、白細(xì)胞粘附分子、B7家族抗原。γ干擾素能有效活化巨噬細(xì)胞、指導(dǎo)B細(xì)胞免疫球蛋白的合成、類(lèi)型轉(zhuǎn)化和分泌。γ干擾素也能通過(guò)抑制Th2的分化和刺激Th1的生長(zhǎng)而影響T輔助細(xì)胞亞型的發(fā)育。γ干擾素在自身免疫和動(dòng)脈粥樣硬化癥等一些炎癥性疾病過(guò)程中起著重要作用。 生物活性的γ干擾素是一個(gè)非共價(jià)結(jié)合的二聚體,其分子量約為20-25KD,有不同程度的糖基化。成熟的人γ干擾素與恒河猴的γ干擾素氨基酸序列同源性接近90%,與牛、犬、馬、貓和豬的γ干擾素有59-64%的同源性,與棉鼠、小鼠和大鼠的γ干擾素同源性為37-43%。干擾素二聚體先與跨膜受體IFN-γ RI(α亞基)結(jié)合,再與IFN-γ RII(β亞基)結(jié)合形成一包含了兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基的功能性復(fù)合體;其中復(fù)合受體中的IFN-γ RII可以增加配體的親和力以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。盡管γ亞基在很多類(lèi)型細(xì)胞上有組成型表達(dá),但β亞基細(xì)胞表達(dá)的調(diào)節(jié)受體γ干擾素反應(yīng)狀態(tài)的影響,并被嚴(yán)格調(diào)控。 γ干擾素在一系列炎癥條件下可由許多的細(xì)胞分泌,包括樹(shù)突狀表皮/γδ T 細(xì)胞、角化細(xì)胞、外周血γδ T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、神經(jīng)元、CD8+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞,CD4+T細(xì)胞和睪丸精子細(xì)胞等等。
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