檢測(cè)原理:
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??谷薋GF單抗包被于微孔板上,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中的FGF會(huì)與固定在板上的抗體結(jié)合,游離的成分被洗去;加入辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記的抗人FGF多抗,未結(jié)合的抗體被洗去;加入底物溶液(顯色劑),溶液顏色與結(jié)合的目標(biāo)蛋白成正比;加入終止液;用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。
檢測(cè)類(lèi)型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測(cè)樣本類(lèi)型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗人FGF basic檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書(shū)一份。
靈敏度:0.089-0.740 pg/mL
檢測(cè)范圍:15.6 - 1,000 pg/mL
回收率范圍:94-119%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖
背景:
FGF basic,也被稱(chēng)為FGF-2(成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2)或HBGF-2(肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子-2),是FGF家族22種有絲分裂蛋白中研究最深入的。家族成員共享35-60%的氨基酸(aa),但只有酸性和堿性的FGF缺乏信號(hào)肽,并由另一途徑分泌。18 kDa FGF基本亞型可在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn),也是分泌的形式??赡艽嬖谟诩?xì)胞內(nèi)或細(xì)胞表面的硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)的貯藏池中。從交替的起始位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生21-23種kDa形式,僅在細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)。18 kDa的人FGF基本序列分別與小鼠/大鼠和牛/羊FGF基本序列有97%和99%的aa同源性。然而,小鼠的FGF基本基因的破壞導(dǎo)致了相對(duì)溫和的心血管、骨骼和神經(jīng)表型,這表明FGF家族的其他成員對(duì)此進(jìn)行了補(bǔ)償。轉(zhuǎn)基因基礎(chǔ)過(guò)表達(dá)主要影響骨的發(fā)育和礦化。
四個(gè)FGF酪氨酸激酶受體(FGF R)及其剪接變體顯示FGF的差異結(jié)合。 FGF基本優(yōu)先結(jié)合具有皮摩爾親和力的FGF R1c和2c。 FGF basic還具有許多其他綁定伙伴,可以根據(jù)它們的位置和數(shù)量來(lái)微調(diào)FGF基本活性。這些包括肝素,整聯(lián)蛋白αvβ3,可溶性FGF R1,F(xiàn)GF結(jié)合蛋白,游離神經(jīng)節(jié)苷脂,血小板反應(yīng)蛋白,五聚體蛋白3,纖維蛋白原,α2-巨球蛋白,血小板衍生的生長(zhǎng)因子和血小板因子-4,所有這些都以納摩爾親和力結(jié)合。這些分子可以充當(dāng)細(xì)胞外基質(zhì)中細(xì)胞,誘餌或儲(chǔ)庫(kù)上的共受體或粘附伴侶,而清除劑或伴侶蛋白則可以作為游離蛋白。 FGF基本與細(xì)胞表面HSPG的結(jié)合特別關(guān)鍵,并且是FGF R的結(jié)合,二聚化和激活所必需的。 FGF基本調(diào)節(jié)正常過(guò)程,例如血管生成,傷口愈合,組織修復(fù),學(xué)習(xí)和記憶以及心臟,骨骼和大腦的胚胎發(fā)育和分化。通過(guò)炎癥介質(zhì),例如TNF-α,IL-1β,IL-2,PDGF和一氧化氮,它被上調(diào)。許多人類(lèi)腫瘤表達(dá)堿性FGF,這可能與腫瘤的血管形成有關(guān)。
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