檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗小鼠CCL5/RANTES抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的小鼠CCL5/RANTES與固相抗體和檢測抗體結合,形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應,在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預包被96孔板
檢測樣本類型:細胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預包被96孔板、標準品、抗小鼠CCL5/RANTES檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:0.089-0.740 pg/mL
檢測范圍:31.3-2000 pg/mL
回收率范圍:96-103%
保存方法:2-8℃
標準曲線圖
背景:
趨化性細胞因子(chemotactic cytokine)對白細胞的趨化作用是炎癥發(fā)生過程中的重要起始步驟,也是機體防御和清除入侵病原體等異物先天性免疫功能的一個重要方面。調節(jié)正常T細胞表達和分泌的活化因子(RANTES)是趨化性細胞因子CC亞族成員,又稱CCL5。該蛋白來源廣泛,多數(shù)組織在炎性因子IL-1β或TNF-α的刺激下可釋放CCL5。通常,CCL5主要由CD8+T細胞、上皮細胞、成纖維細胞和血小板分泌。
CCL5同其他趨化性細胞因子相同,能以單體形態(tài)或多聚形態(tài)與其特異性受體結合。CCL5具有二聚體的結構基礎,在高濃度時形成多聚體,胞內分泌后常以單體形式存在。細胞表面的糖胺多糖(GAG)可導致CCL5的多聚化。多聚化CCL5不僅可以激活炎性細胞,延長并加重炎性反應,還可調節(jié)細胞的生長和分化。當CCL5為單體或雙體或濃度為納摩爾級時,其受體為CCR1、CCR3、CCR4 和CCR5,具有趨化活性、可增強細胞毒作用和抑制HIV復制的作用。多聚體形式或微摩爾水平的CCL5主要通過與細胞表面的GAG結合導致T細胞、單核細胞及巨噬細胞的活化,增強HIV的復制。
CCL5對多種白細胞具有趨化作用:1)趨化單核細胞;2)趨化未刺激的CD4+CD45RO+記憶T細胞以及活化后的CD4+和CD4+T細胞;3)趨化嗜酸性粒細胞并刺激其脫顆粒和呼吸爆發(fā);4)是嗜堿性粒細胞較強的趨化劑,但刺激組胺釋放的作用較弱;5)預處理T細胞,可增加其與IL-1刺激內皮細胞粘附的能力。這些性質使CCL5在免疫調節(jié)功能及自身免疫紊亂和炎性過程中有重要作用。
CCL5不僅作為一種趨化因子參與炎癥反應和介導白細胞的游走和浸潤,而且可調節(jié)細胞的生長和分化。
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