RNALater™動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液

信裕生物的RNALater™動(dòng)物組織RNA穩(wěn)定保存液(RNALater™ RNA Stabilization Reagent for Animal Tissue)，簡稱RNALater™試劑或RNALater™，是一種用于采集動(dòng)物組織時(shí)，僅需室溫操作，即可迅速抑制RNase并穩(wěn)定保存組織樣品中RNA的無毒無害液態(tài)試劑。本產(chǎn)品廣泛用于新鮮動(dòng)物組織樣品或細(xì)胞樣品中RNA的穩(wěn)定與保存。 
　　本產(chǎn)品使用范圍廣。本產(chǎn)品能夠用于各種動(dòng)物組織樣品中RNA的穩(wěn)定和保存，如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉、骨組織等，也可用于培養(yǎng)細(xì)胞、真菌、細(xì)菌、血液以及某些植物樣品的保存。 
　　本產(chǎn)品的效果和液氮凍存的效果一致。本產(chǎn)品可以迅速滲透到組織內(nèi)部，完全抑制RNase，避免RNA降解，保持組織RNA的完整性，從而完美保存組織中的基因表達(dá)譜，并且和液氮一樣可以長期保存樣品中的RNA。 
　　本產(chǎn)品安全便捷。本產(chǎn)品無任何毒性和刺激性，可室溫使用，確保了使用時(shí)的安全和便捷。和使用液氮相比，可以有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患，并且攜帶、運(yùn)輸非常方便。 
　　本產(chǎn)品適用于普通新鮮組織或細(xì)胞樣品中RNA的穩(wěn)定和保存，更加適合樣品收集后不能夠立即進(jìn)行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況，特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動(dòng)物組織樣品和不能立即凍存樣品的RNA穩(wěn)定與保存。 
　　在本產(chǎn)品中樣品的保存時(shí)間和存儲溫度相關(guān)，例如37℃可保存1-2天，室溫可保存一周，4℃可以保存1個(gè)月，-20℃或更低溫度可以長期保存。具體如下表所示：

　　使用本產(chǎn)品在-20℃或-80℃凍存的樣品，反復(fù)凍融3-5次不會顯著影響RNA的質(zhì)量。通常情況下，推薦把本產(chǎn)品保存的樣品在室溫或4℃運(yùn)輸或短期存放，-20℃或-80℃長期存放。如果希望-20℃或-80℃長期存放，必須先4℃存放過夜或更長時(shí)間后，才能轉(zhuǎn)移到更低溫度存放。 
　　本產(chǎn)品對于小鼠組織和HeLa細(xì)胞樣品的保存效果如圖1所示。組織和細(xì)胞用RNALater™分別在4℃保存1個(gè)月、室溫保存1周以及37℃保存1天后，抽提獲得的RNA與新鮮樣品一樣均能夠保持完整性；而用PBS在37℃保存1天后，大部分RNA都已經(jīng)被降解。

　　圖1. RNALater™對于小鼠組織和HeLa細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定保存效果。按照圖中相應(yīng)條件保存后，利用信裕生物的RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)(R0024/R0026/R0027)抽提RNA，隨后取相同體積的RNA樣品變性處理后，在含6.67%甲醛和適量NA-Red的1.2%變性瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳檢測。

　　本產(chǎn)品保存的組織樣品能用常規(guī)的RNA抽提方法進(jìn)行RNA抽提，如Trizol法和離心柱法等，特別適用于信裕生物的RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)(R0024/R0026/R0027)。使用時(shí)直接將樣品從RNALater™中取出當(dāng)作普通的新鮮或凍存的樣品即可，少量殘留的RNALater™試劑不會影響后續(xù)抽提效果。 
　　本產(chǎn)品也可用于組織中蛋白和DNA的穩(wěn)定和保存，但RNALater™會導(dǎo)致蛋白變性，后續(xù)可進(jìn)行Western Blot、SDS-PAGE等實(shí)驗(yàn)，而不適用于檢測酶活力等須保持蛋白活性的實(shí)驗(yàn)。如需保持蛋白酶活力，可以選用信裕生物的AllProtect™動(dòng)物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液(R0121)。樣品從RNALater™中取出后可直接當(dāng)作新鮮或凍存的樣品按照常規(guī)方法進(jìn)行蛋白提取。 
　　一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以用于約100-200個(gè)重量為100mg樣品的保存。 
包裝清單：

保存條件：
　　室溫或4℃保存，2年有效。
注意事項(xiàng)：

　　實(shí)驗(yàn)中獲得的組織樣品適當(dāng)處理大小后，應(yīng)迅速并完全浸泡在RNALater™試劑中。 
　　本產(chǎn)品適用于新鮮動(dòng)物組織樣品或細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定與保存。樣品凍存后再用RNALater™保存的效果會比直接將新鮮樣品用RNALater™保存差很多。本產(chǎn)品盡管對于凍存的樣品也有一定的穩(wěn)定保存作用，但更適合新鮮樣品。 
　　用本產(chǎn)品保存后，樣品可能會變得微硬，為正?，F(xiàn)象，不會影響后續(xù)RNA抽提時(shí)組織的勻漿、裂解等操作。
　　樣品如果需要-20℃或-80℃長期保存，應(yīng)4℃保存過夜或更長時(shí)間后才能再轉(zhuǎn)移至-20℃或-80℃保存，以保證RNALater™試劑更加充分有效地完全浸入組織內(nèi)部。 
　　-20℃或-80℃保存情況下，樣品解凍時(shí)RNALater™試劑中可能有結(jié)晶析出，屬正?，F(xiàn)象，可待結(jié)晶完全溶解后使用，不會影響后續(xù)RNA的抽提效果。 
　　血液白細(xì)胞樣品按照常規(guī)方法分離后，可以參考細(xì)胞樣品的方法進(jìn)行保存。 
　　用于植物樣品保存時(shí)，應(yīng)當(dāng)去除表面蠟質(zhì)，確保RNALater™試劑能充分進(jìn)入組織內(nèi)部。 
　　本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。 
　　為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 對于組織樣品：
a. 保存：將組織剪切成長寬高均不大于0.5厘米的組織塊，迅速完全浸泡于5-10倍體積RNALater™試劑中(例如100mg組織需約0.5-1ml RNALater™試劑)，此時(shí)室溫可以保存一周，4℃可以保存一個(gè)月，4℃至少保存過夜后可以在-20℃或-80℃保存3-5年。組織塊過大時(shí)，RNALater™試劑會出現(xiàn)不易充分滲透到組織中心處的問題，導(dǎo)致未充分滲透處RNA出現(xiàn)一定程度的降解。
b. RNA抽提時(shí)樣品的處理：用潔凈的鑷子將組織塊從RNALater™試劑中取出，紙巾吸除表面殘液，迅速置于適當(dāng)裂解液中進(jìn)行勻漿或液氮中進(jìn)行研磨操作。后續(xù)即可采用離心柱法或Trizol等進(jìn)行RNA抽提操作。 
2. 對于細(xì)胞等樣品：
a. 保存：收集的新鮮細(xì)胞樣品用PBS洗滌后，5000g離心1-2分鐘，吸除PBS后小心加入5-10倍體積RNALater™試劑，避免將細(xì)胞沖起，然后置于相應(yīng)溫度條件下保存?zhèn)溆谩?br /> 注意：盡量保持細(xì)胞樣品處于緊實(shí)狀態(tài)，避免細(xì)胞重懸，否則可能會對后續(xù)RNA得率有一些影響。對白細(xì)胞、細(xì)菌、真菌樣品進(jìn)行保存時(shí)，請參考細(xì)胞的方法進(jìn)行。
b. RNA抽提時(shí)樣品的處理：加入與RNALater™試劑等體積的PBS或DEPC水，10,000g離心1分鐘收集細(xì)胞樣品，小心吸除上清液，后續(xù)即可采用離心柱法或Trizol進(jìn)行RNA抽提操作。當(dāng)保存樣品的RNALater™試劑的體積小于100μl時(shí)，可以直接加入RNAeasy™動(dòng)物RNA抽提試劑盒(離心柱式)(R0024/R0026/R0027)中的裂解液300μl，當(dāng)RNALater™試劑的體積在100-200μl之間時(shí)可以直接加入600μl裂解液，隨后按照試劑盒的操作步驟提取總RNA。