檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人PD-1抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的PD-1與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。
檢測(cè)類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測(cè)樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、PD-1檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:18.9 pg/mL
檢測(cè)范圍:156.0 - 10,000 pg/mL
回收率范圍:85.0-111.9%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
程序性死亡-1 受體(PD-1)又稱 CD279,是免疫調(diào)節(jié)受體 CD28 家族的 I 型跨膜蛋白,該家族的其他成員包括 CD28、 CTLA-4、 ICOS 和 BTLA。 其細(xì)胞質(zhì)尾部含有兩個(gè)酪氨酸殘基, 組成了基于酪氨酸的免疫受體抑制結(jié)構(gòu)域(ITIM)和開關(guān)結(jié)構(gòu)域(ITSM), 這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)閷?dǎo) PD-1 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)非常重要。 PD-1 作為一個(gè)單體受體, 能與其配體 PD-L1(B7-H1)和 PD-L2 (B7-DC)以 1:1 的比例相互作用。 PD- 1 在活化的 T 細(xì)胞、 B 細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞中有表達(dá), 而 PD- L1 除了在以上細(xì)胞中, 還在非造血細(xì)胞(如肺內(nèi)皮細(xì)胞和肝細(xì)胞等) 中都有表達(dá)。 PD-L1 和 PD-1 的結(jié)合能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生共抑制信號(hào), 促使 T 細(xì)胞失活、 凋亡、 功能衰竭。 因此, PD-1 和 PD-L1 相互作用是免疫反應(yīng)閾值和外周免疫耐受的關(guān)鍵調(diào)控因子。 通過抗體或基因調(diào)控阻斷 PD-1 和 PD-L1 的相互作用可以加速腫瘤的根除, 提示了 PD-1 作為癌癥免疫治療靶標(biāo)的潛力。
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