檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-1β抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-1β與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、IL-1β檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:1.0pg/mL
檢測范圍: 3.9 - 250 pg/mL
回收率范圍:85-107%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
白細(xì)胞介素-1(IL-1)蛋白家族成員中包括經(jīng)典的IL-1α和IL-1β。IL-1受體拮抗劑(IL-1RA)、IL-18、IL-33和IL-1F5-F10,IL-1α和IL-1β有相同的細(xì)胞表面結(jié)合受體,形式相同的生物學(xué)功能。健康人未刺激的細(xì)胞是不產(chǎn)生IL-1的,只有皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、一些上皮細(xì)胞,以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些細(xì)胞是例外。但在響應(yīng)炎癥因子、感染、或微生物內(nèi)毒素時,IL-1在巨噬細(xì)胞和其他類型細(xì)胞表達(dá)急劇增加。IL-1β在免疫和炎癥應(yīng)答、骨重塑、發(fā)熱、碳水化合物代謝、GH/IGF-1的生理過程中起重要作用。多種疾病與IL-1表達(dá)失調(diào)或延時表達(dá)相關(guān),其中包括敗血癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎性腸道疾病、急性和慢性髓細(xì)胞白血病、胰島素依賴型糖尿病、動脈粥狀硬化、神經(jīng)損傷和老年退化有關(guān)的疾病。
IL-1α和IL-1β是結(jié)構(gòu)相關(guān)的多肽,在氨基酸水平約有25%的同源性。兩者都是先合成為31kDa前體,然后裂解為大約17.5kDa的成熟蛋白。由Caspase-1/ICE對IL-1β的前體切割是炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵步驟。盡管IL-1α和IL-1β都不含有一個典型的疏水信號肽,但有證據(jù)表明,它們可以經(jīng)非經(jīng)典途徑分泌到胞外。未處理的IL-1α部分可在細(xì)胞膜上展示,并可能保留生物活性。與IL-1β前體不同,IL-1β前體與成熟的IL-1β相比,具有很少或根本不具有生物活性。IL-1β前體與成熟的IL-1β都運(yùn)至胞外。
IL-1α和IL-1β通過免疫球蛋白超家族受體與IL-1RA結(jié)合發(fā)揮其效應(yīng)。80kDa的I型跨膜受體(IL-1RI)在多種細(xì)胞中表達(dá),包括T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、滑膜襯里細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和肝細(xì)胞。68kDa的II型跨膜受體(IL-1RII)在B細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和骨髓細(xì)胞中表達(dá)。IL-1RI和IL-1RII的胞外區(qū)域享有28%的同源性。但其他區(qū)域有顯著不同:II型受體的胞內(nèi)域只有29個氨基酸,而I型受體的胞內(nèi)域有213個氨基酸。IL-1RII似乎對IL-1信號沒有響應(yīng),其功能是作為誘騙受體從而削弱IL-1的作用。IL-1受體配體蛋白(IL-1RAcP)與IL-1RI相互作用是IL-1RI信號傳導(dǎo)所必需的。IL-1RA是分泌型分子,是IL-1的競爭性抑制劑??扇苄?span lang="EN-US">IL-1RI和IL-1RII存在于人的血漿、關(guān)節(jié)液、及幾種細(xì)胞株的條件培養(yǎng)基中。此外,牛痘病毒編碼類似于可溶性IL-1RII的IL-1結(jié)合蛋白。
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