10×TBE Buffer(又名TBE電泳液)
緩沖液配制原理: 只要知道緩沖對的PH值,和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度),就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對數(shù)換算,較麻煩,前人為減少后人的計(jì)算麻煩,為為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH,經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nmpH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。 經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升,而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。 計(jì)算好后,按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分,放于燒杯中,加少量蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶,加蒸餾水至刻度,搖勻,就能得到所需的緩沖液。 各種緩沖溶液的配制,均按表格按比例混合,某些試劑,必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行,如醋酸、氫氧化鈉等。另外,所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。 實(shí)驗(yàn)方法原理 溶液pH值的測定,在自然科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域中都有廣泛的應(yīng)用,在醫(yī)藥領(lǐng)域中有著非常重要的意義。例如合成或分析反應(yīng)條件的控制,注射液或其他藥劑的配制等,經(jīng)常需要準(zhǔn)確測定pH值。所以溶液pH值的測定是儀器分析中普及程度非常高的一種方法。 1. 基本概念 在一定程度上能抵抗外加少量酸、堿或稀釋,而保持溶液pH值基本不變的作用稱為緩沖作用。具有緩沖作用的溶液稱為緩沖溶液。 2. 緩沖溶液組成及計(jì)算公式 緩沖溶液一般是由共軛酸堿對組成的,例如弱酸和弱酸鹽,或弱堿和弱堿鹽。如果緩沖溶液由弱酸和弱酸鹽 (例如HAc-NaAc)組成 3. 緩沖溶液性質(zhì) a.抗酸/堿,抗稀釋作用 因?yàn)榫彌_溶液中具有抗酸成分和抗堿成分,所以加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其pH值基本上是不變的。稀釋緩沖溶液時(shí),酸和堿的濃度比值不改變,適當(dāng)稀釋不影響其pH值。 b.緩沖容量緩沖容量是衡量緩沖溶液緩沖能力大小的尺度。緩沖容量的大小與緩沖組分濃度和緩沖組分的比值有關(guān)。緩沖組分濃度越大,緩沖容量越大;緩沖組分比值為1時(shí),緩沖容量大。 實(shí)驗(yàn)步驟: 1. 緩沖溶液的配制與pH值的測定 通過計(jì)算配制三種不同pH值的緩沖溶液,然后用精密pH試紙和pH計(jì)分別測定它們的pH值, pH計(jì)的使用要嚴(yán)格按照儀器說明書操作,事先要用適當(dāng)?shù)膒H標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)。測量完畢后,將測定結(jié)果進(jìn)行比較,看理論計(jì)算值與兩種測定方法實(shí)驗(yàn)值是否相符(溶液留作后面實(shí)驗(yàn)用)。 2. 緩沖溶液的性質(zhì) (1) 取3支試管,依次加入蒸餾水,pH=4的HCl溶液,pH =10的NaOH溶液各3mL,用pH試紙測其pH值,然后向各管加入5滴0.1 mol/L HCl,再測其pH值。用相同的方法,試驗(yàn)5滴0.1 mol/L NaOH對上述三種溶液pH值的影響。將結(jié)果記錄在表2中。 (2) 取3支試管,依次加入自己配制的pH=4.0、pH=7.0、pH=10.0的緩沖溶液各3mL。然后向各管加入5滴0.1 mol/L HCl,用精密pH試紙測其pH值。用相同的方法,試驗(yàn)5滴0.1 mol/L NaOH對上述三種緩沖溶液pH值的影響。將結(jié)果記錄在表2中。 (3) 取5支試管,依次分別加入pH=4的HCl溶液,pH=10的NaOH溶液及pH=4.0緩沖溶液、pH=7.0緩沖溶液、pH=10.0的緩沖溶液各1 ml,用精密pH試紙測定各管中溶液的pH值。然后向各管中加入10 ml水,混勻后再用精密pH試紙測其pH值,考查稀釋上述五種溶液pH值的影響。將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄于表2,通過以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,說明緩沖溶液的什么性質(zhì)。 3. 緩沖溶液的緩沖容量 (1) 緩沖容量與緩沖組分濃度的關(guān)系 : 取兩支大試管,在一試管中加入0.1 mol/L HAc和0.1 mol/L NaAc各3ml,另一試管中加入1 mol/L HAc和1 mol/L NaAc各3ml,混勻后用精密pH試紙測定兩試管內(nèi)溶液的pH值(是否相同)?在兩試管中分別滴入2滴甲基紅指示劑,溶液呈何色?(甲基紅在pH<4.2時(shí)呈紅色,pH>6.3時(shí)呈黃色)。然后在兩試管中分別逐滴加入1 mol/L NaOH溶液(每加入1滴NaOH均需搖勻),直至溶液的顏色變成黃色。記錄各試管所滴入NaOH的滴數(shù),說明哪一試管中緩沖溶液的緩沖容量大。 (2) 緩沖容量與緩沖組分比值的關(guān)系: 取兩支大試管,用吸量管在一試管中加入NaH2PO4和Na2HPO4各10 ml,另一試管中加入2ml 0.1 mol/L NaH2PO4和18ml 0.1 mol/L Na2HPO4,混勻后用精密pH試紙分別測量兩試管中溶液的pH值。然后在每試管中各加入1.8mlmol/L NaOH,混勻后再用精密pH試紙分別測量兩試管中溶液的pH值。
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