中文名稱:大腸桿菌DB3.1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 英文名稱:DB3.1 Competent Cell |
保存條件: 常溫運(yùn)輸和保存 | 純度規(guī)格: 99.99% |
產(chǎn)品類別: 分子生物學(xué) 克隆及表達(dá) |
大腸桿菌DB3.1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是采用大腸桿菌 DB3.1 細(xì)胞含有 gyrA462 基因,對(duì)λ噬菌體的 ccdB 基因 產(chǎn)物的毒性具有抵抗作用,特別適合用于轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增包含 ccdB 基因的質(zhì)粒載體。
1. 使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107,-80℃保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改 變。
2. DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞具有鏈霉素抗性。
3. DB3.1 菌株基因型: F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-) supE44 Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR) xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,使用方便,質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。
規(guī)格及成分成分 編號(hào) 小扁盒包裝
本產(chǎn)品 140218 0.1mL×10
使用手冊(cè) 140218sc 1 份
運(yùn)輸及保存 干冰運(yùn)輸、-80℃保存,有效期半年。
使用方法
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100μl,可以根 據(jù)實(shí)際情況分裝使用。 以下實(shí)驗(yàn)以 100 μl 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的 DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適 量的 DNA,通常 100 μl 感受態(tài)細(xì)胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和),用 移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
3. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
4. 每個(gè)離心管中加入 450 μl 無(wú)菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于 37℃搖床,150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含有相應(yīng)抗生素的 LB 固體瓊脂 培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于 37℃直至液體被吸收, 倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
注意:
1 涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平 板;若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少,可取 200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù) 較少,可通過(guò)離心(4,000 rpm ,2 分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布 于平板中。
2 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少,可以將剩下的菌液再 涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
成立日期 | 2016-08-08 (9年) | 注冊(cè)資本 | 100萬(wàn)元整 |
員工人數(shù) | 1-10人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生物化工,有機(jī)原料,化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料,技術(shù)服務(wù) | 經(jīng)營(yíng)模式 | 貿(mào)易,試劑,定制,服務(wù) |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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