大腸桿菌BL21(DE3)pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品及特點(diǎn)BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞來源于 BL21(DE3)菌株，由特殊工藝制作，使用 pUC19質(zhì)粒檢測(cè)本產(chǎn)品，轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107cfu/μg。BL21 Star(DE3)菌株的特點(diǎn)是含有 rne131 基因突變體。rne131 突變基因能夠增強(qiáng)菌株細(xì)胞內(nèi) mRNA 的穩(wěn)定性，從而有效提高蛋白表達(dá)能力。本產(chǎn)品主要適用于 T7 啟動(dòng)子表達(dá)載體(如 pET 系列)的高水平蛋白表達(dá)。菌株基因型為：F- ompT hsdSB(rB-mB) gal dcm rne131(DE3)
規(guī)格及成分 成分 編號(hào) 包裝
本產(chǎn)品 90507 0.1 mL×10
使用手冊(cè) 1 份

運(yùn)輸及保存 干冰運(yùn)輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑 目的 DNA、LB 培養(yǎng)基等

使用方法

 1. 從-80℃冰箱中取出感受態(tài)細(xì)胞，置于冰上解凍。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100μL，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。

2. 取 100μL 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置 25 分鐘。

3. 42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

4. 向離心管中加入 700μL 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(LB)，混勻后 37℃，200rpm 復(fù)蘇60 分鐘。

5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相應(yīng)抗生素的 LB 培養(yǎng)基上。如果轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒，可以減少涂布的量。

6. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。