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臺盼藍(lán)染色液(0.4%)說明書
貨號: CC1180
規(guī)格: 50mL/100mL
保存: 4℃保存，有效期12個(gè)月
產(chǎn)品說明:
臺盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，細(xì)胞不會被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需 3-5 分鐘，操作簡單。
使用說明:
1. 收集細(xì)胞：
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用1000-2000rpm離心1分鐘，棄上清，制備單細(xì)胞懸液，并做適當(dāng)稀釋。
2. 臺盼藍(lán)染色：
細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1比例混勻（終濃度0.04%），染色3分鐘 (染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠，但染色時(shí)間可以更長一些，但不宜超過10分鐘) 。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：
吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無光澤；活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞存活率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100%
注意事項(xiàng):
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