通用型全基因組擴增試劑盒(WGA)
產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品是用于基因組DNA擴增全基因組的試劑盒,可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。本產(chǎn)品有如下優(yōu)點:
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超強鏈取代能力。
2. 可以擴增基因組達(dá)上萬倍,具有高產(chǎn)量和高保真性的特點。
3. 可使用各種來源的樣品,包括全血,干血,發(fā)根,口腔粘膜刮液培養(yǎng)細(xì)胞,真菌和病毒等。
4. 操作簡便快捷,恒溫(30℃)反應(yīng),無須PCR儀即可實現(xiàn)擴增。
5. 產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗,包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析(片段差異,微衛(wèi)星差異,SNP,STR)等。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 十孔盒包裝
WGA 溶液 A 100941a 250 μL(白蓋)
2×WGA 溶液 B 100941b 300 μL(藍(lán)蓋)
phi 29 DNA 聚合酶(10U/μL) 100941c 25 μL(紅蓋)
使用手冊 100941sc 1 份
自備試劑 超純水(無 DNA 和 DNase 污染)
運輸及保存 低溫運輸、-20℃保存, 有效期一年。
使用方法本產(chǎn)品適用于純化好的基因組DNA。
一、模板變性
1. 在PCR塑料管中加入9μL WGA溶液A,加入1μL純化好的基因組DNA模板(DNA含量好在10ng-100ng之間)。
2. 在PCR儀器上95℃3分鐘變性模板DNA。注意:必須打開熱蓋。
3. 冰上放置待用。
4. 加入10 μL 2×WGA溶液B,輕柔吹打混勻。
5. 加入1 μL phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),輕柔吹打混合均勻。
6. 30℃保溫10-12小時。好使用PCR儀進行30℃保溫并打開熱蓋保溫。如果采用30℃水浴,好在樣品管中加入30-50μL石蠟油以防水分蒸發(fā),因為30℃長時間的水浴也能使水分蒸發(fā)到管壁,從而改變反應(yīng)體系中各成分的濃度、降低WGA反應(yīng)效率。如果模板DNA量比較高,WGA三小時即可檢測到DNA擴增。
7. 65℃保溫20分鐘使phi29 DNA聚合酶徹底滅活,然后-20℃長期放置或立即
使用。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以強烈推薦反應(yīng)結(jié)束后65℃保溫20分鐘以將酶徹底滅活以免其干擾后續(xù)反應(yīng)或長期保存時其降解DNA。
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