RIPA裂解液（強(qiáng)）
產(chǎn)品及特點(diǎn)RIPA（Radio Immunoprecipitation Assay）裂解液是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的 Western、IP 等實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品裂解強(qiáng)度較強(qiáng)，對(duì)膜蛋白、胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白和各種轉(zhuǎn)錄因子均有很好的效果，本產(chǎn)品含有各種蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制劑，能有效防止各種蛋白酶對(duì)目的蛋白的降解。我公司各種 RIPA 裂解液產(chǎn)品特點(diǎn)見下表：
產(chǎn)品名稱RIPA 裂解液(強(qiáng))RIPA 裂解液(中)
RIPA 裂解液(弱)裂解強(qiáng)度 強(qiáng) 中 溫和
對(duì)膜蛋白的提取 很好 較好 一般
對(duì)胞漿蛋白的提取 很好 很好 很好
對(duì)核蛋白的提取 很好 較好 較好
胞漿磷酸化蛋白提取 很好 很好 很好
細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子提取 很好 很好 很好
含蛋白酶抑制劑 是 是 是
含磷酸酯酶抑制劑 是 是 是
主要用途 WB, IP WB, IP WB, IP, co-IP
規(guī)格及成分 成 份 大立盒包裝
RIPA 裂解液（強(qiáng)裂解度） 250 mL
使用手冊(cè) 1 份
使用方法 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞
2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高
可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
對(duì)于組織樣品：
1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
注：RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA 等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如 NF-kappaB、p53 等時(shí)，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。
關(guān)鍵字： RIPA裂解液（強(qiáng)）廠家；RIPA裂解液（強(qiáng)）現(xiàn)貨
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品。總部位于上海，并在北京、廣東，江西，吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。