線狀DNA清除劑
產(chǎn)品及特點(diǎn) 分離純化環(huán)狀DNA(質(zhì)粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA和某些病毒DNA)的時(shí)候經(jīng)常需要去除其中的基因組DNA污染,否則會(huì)對(duì)后續(xù)的PCR、WGA和測(cè)序等反應(yīng)產(chǎn)生干擾。而基因組DNA一般都十分巨大,無(wú)論是線狀(如真核細(xì)菌基因組DNA)還是環(huán)狀(如細(xì)菌DNA),經(jīng)過(guò)常規(guī)的DNA純化過(guò)程都會(huì)變成20-50 Kb大小的線狀DNA,而上述環(huán)狀DNA一般還能保持環(huán)狀構(gòu)型。根據(jù)這一特點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了專(zhuān)門(mén)用于去除線狀DNA的本產(chǎn)品,它有如下優(yōu)點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,不需用戶(hù)花費(fèi)大量時(shí)間去摸索各種條件。
2. 酶法去除線性DNA,專(zhuān)一性強(qiáng),可以使線狀DNA污染降級(jí)幾個(gè)數(shù)量級(jí),不會(huì)干擾后續(xù)試驗(yàn)。
3. 不降解有nick和gap的環(huán)狀DNA,包括質(zhì)粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA、環(huán)狀病毒DNA。
4. 處理不依賴(lài)于DNA序列,可降解任何線狀DNA。而內(nèi)切酶去除線狀DNA則需要預(yù)先確知其在環(huán)狀DNA上沒(méi)有酶切位點(diǎn)。
5. 得到的環(huán)狀DNA可用于多種后續(xù)試驗(yàn),尤其是WGA、PCR和測(cè)序等對(duì)污染敏感的試驗(yàn)。
線狀DNA清除劑
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 十孔盒包裝
線狀 DNA 清除劑溶液 A 101101a 100 uL 線狀 DNA 清除劑溶液 B 101101b 30 uL 微量核酸沉淀劑 50903 2 mL使用手冊(cè) 101101sc 1 份
線狀DNA清除劑運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸、-20℃保存, 有效期一年。自備試劑 超純水、75%乙醇
使用方法 1. 在干凈塑料離心管中,按下表加入各成分(30 uL體系):
2. 加200 uL石蠟油后,37℃保溫16小時(shí)。如果使用熱蓋打開(kāi)的PCR儀則可以不加石蠟油。注意:保溫時(shí)間過(guò)短可能會(huì)形成短的DNA片段,影響后續(xù)反應(yīng),所以保溫16小時(shí)。由于保溫時(shí)間太長(zhǎng),不加石蠟油或不開(kāi)熱蓋則反應(yīng)體系中的水分在16小時(shí)的保溫期間會(huì)蒸發(fā)到管蓋上,嚴(yán)重影響反應(yīng)的正常進(jìn)行。
3. 65℃加熱滅活線狀DNA清除反應(yīng)的酶。
4. 反應(yīng)液可以直接使用。如果需要純化,則將30 uL酶反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的1.5 mL離心管中,再加入60 uL 微量核酸沉淀劑。如果沒(méi)有使用石蠟油,則直接在30 uL酶反應(yīng)溶液中加入60 uL 微量核酸沉淀劑。注意:微量核酸沉淀劑有沉淀,取用前需要充分搖勻。
5. 室溫15000 g離心10分鐘。
6. 棄上清后加自備的75%乙醇1 mL,振蕩混勻。
7. 15000 離心3-5分鐘,棄上清。
8. 再短暫離心后小心吸棄上清,沉淀即為回收的DNA沉淀,可溶于自備超純水中后直接使用或放-20℃冰箱長(zhǎng)期保存。
關(guān)鍵字: 線狀DNA清除劑廠家;線狀DNA清除劑現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專(zhuān)營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾#⒃诒本?、廣東,江西,吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。