柱式昆蟲RNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是專門用于從富含多糖、糖蛋白、粘蛋白的動物樣品（尤其是昆蟲樣品）中提取總 RNA 的試劑。該產(chǎn)品特點(diǎn)如下：
1. 操作簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。
2. RNA 純度高，平均 OD260/280 一般都在 2.0 左右，能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。
3. 適用于各種昆蟲組織，每 100mg 組織能提取到 20-30ug 總 RNA。
4. 得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 雜交、cDNA 合成等實(shí)驗(yàn)。
5. 一站式，提供 RNase-free 的樣品收集管。
柱式昆蟲RNAout
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝
溶液 A 81220A 50 mL 溶液 B 81220B 15 mL
溶液 C 81220C 50 mL 離心吸附柱 60911 50 套
通用洗柱液 60408 50 mL RNA 洗脫液 71207 10 mL
使用手冊 81220sc 1 份
柱式昆蟲RNAout運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，溶液 B 放 4℃長期保存，有效期一年。 自備試劑 氯仿
使用方法
1. 將 50-300mg 昆蟲組織放入 10-15 mL 塑料離心管中，加入 1 mL 溶液 A，然后用勻漿器勻漿 5-20 秒。勻漿時會產(chǎn)生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織，硯磨完后加入 1 mL 溶液 A。注意：溶解溶液 A 沉淀。溶液 A 在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
2. 將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的 1.5 mL 塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。
3. 在離心管中加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 自備氯仿，在振蕩器上振蕩30 秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
4. 室溫 12,000 rmp 離心 3-5 分鐘，兩相間將有約 5-10 毫米厚的細(xì)胞破碎物。
5. 將上清液(約 0.6 mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的 1.5 mL 塑料離心管中，下層有機(jī)相和中間層含有 DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，避免觸及或吸取。留下 100 uL上清液不取。
6. 加入等體積的溶液 C，充分顛倒混勻。
7. 將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12,000 rmp 室溫離心半分鐘，棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中， 12,000 rmp 室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加 0.7 mL 通用洗柱液，室溫 12,000 rmp 離心半分鐘，棄穿透液。
10. 加 0.3 mL 通用洗柱液，室溫 12,000 rmp 離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。
11. 室溫 12,000 rmp 離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響 RNA的使用。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到 RNase-free 收集管中，加入 50-100 uL RNA 洗脫液，室溫放置 1-2 分鐘。
13. 12,000 rmp 室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為 RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做 Northern 雜交，強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性進(jìn)行 RNA 電泳，因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的 RNA 分子（BioTechniques，28：414，2000）。注意：大部分昆蟲的 28S RNA 被切割成兩個小的片段，彼此用氫鍵相連，所以在甲醛變性膠中，沒有 28S帶出現(xiàn)（文獻(xiàn)見：Eva C. Winnebeck，Craig D. Millar and Guy R. Warman，Why does insect RNA look degraded? Journal of Insect
Science: Vol. 10：1-7）
15. RNA 產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將 5-10 μL RNA 溶于 TE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在 OD260 的光吸收。通過光吸收可以得出 RNA 濃度（1 OD260 的RNA=40 μg/mL），進(jìn)而計算出 RNA 的產(chǎn)量（濃度 X 體積)和產(chǎn)率(RNA 產(chǎn)量/組織用量)。
16. RNA 純度測定：無污染的總 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響 RT-PCR 等反應(yīng)。
關(guān)鍵字： 柱式昆蟲RNAout廠家；柱式昆蟲RNAout現(xiàn)貨
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。