普魯士藍染色試劑盒（中性紅法）

• RS4020
• 2×50mL/2×100mL
• 室溫保存，有效期1年。
•  

•  
• Hemosiderin）是一種血紅蛋白源性色素，為金黃色或棕黃色顆粒，因其含鐵、金黃色，故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下，血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質和含鐵的含鐵血黃素。

      Perls普魯士藍反應（Prussian blue reaction）又稱為含鐵血黃素染色，即經過亞鐵氰化鉀和稀酸處理后可以產生藍色，常見于吞噬細胞內會間質內，主要顯示三價鐵鹽。Perls普魯士藍是非常經典的組織化學反應，是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法，其染色原理為：亞鐵氰化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質中被稀鹽酸分離出來，三價鐵與亞鐵氰化鉀反應，生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵氰化物普魯士藍，所以該反應被稱為普魯士藍反應。三價鐵的亞鐵氰化物是一種很穩(wěn)定的化合物，在反應后可用紅色染色劑進行復染，如核固紅、伊紅、中性紅等。

Perls stain常用于顯示局部組織內各種出血性病變，常見于吞噬細胞內。在判斷含鐵血黃素沉積時，用Perls反應可以得到證實，該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產生沉淀、應用范圍廣、可以進行復染。

1、10%的中性福爾馬林固定液

2、系列乙醇 

3、蒸餾水 

4、4%的多聚甲醛

•  
•  
• 、 組織固定于10%中性福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。
• 、切片厚度4um，常規(guī)脫蠟至水。
• 、蒸餾水洗1min.。
• 、切片入Perls stain（見注意事項4），浸染15～30min。
• 、蒸餾水充分沖洗2～5min 。
• 、入中性紅染色液，淡染細胞核15～30s。
• 、自來水沖洗1～5s。
• 、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固。
•  
• 、 無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗2～3min。
• 、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時間可以相應縮短。
•  
• 、4%多聚甲醛固定10～20min。
• 、自來水沖洗2次，每次2min。
• 、蒸餾水沖洗2次，每次2min。
• 、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時間可以相應縮短。
•  

含鐵血黃素或三價鐵   藍色

細胞核、其他組織     紅色

陰性對照（可選）

取相同連續(xù)切片脫蠟至水。置于5%的草酸中，孵育2～6h后，經Perls stain，需要步驟同上。結果為陰性。

1. 切片脫蠟應盡量干凈。
2. 組織固定常采用10%的中性福爾馬林，經普通福爾馬林長期固定后，組織會有損傷。避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。
3. 整個操作過程中容器要干凈，避免使用金屬鐵制品，洗切片和容器時以蒸餾水為宜，因普通水內含鐵質。
4. Perls stain染色時，應根據(jù)樣品情況調整著色時間。
5. 所有切片都應使用同一個陽性對照切片，選擇適合的對照非常重要。尸檢肺組織是一個很好的對照，包含相當數(shù)量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞)。

6、系列乙醇應經常更換新液。
7、冰凍切片和細胞的染色，應根據(jù)具體情況摸索實驗條件。
8、為了您的健康和安全，請穿實驗服并戴一次性手套操作。