價(jià)格 | ¥1490 |
包裝 | 50次 |
最小起訂量 | 50次 |
發(fā)貨地 | 上海 |
更新日期 | 2024-12-23 |
中文名稱:綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒 | 英文名稱:Eperythrozoon ovis |
保存條件: -20℃ | 純度規(guī)格: 99.99% |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 |
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒
特別提示:包括綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒
英文名稱:Eperythrozoon ovis
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品名稱
方法
規(guī)格
價(jià)格
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)LAMP試劑盒
LAMP
50次
2490元
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒
PCR
50次
1490元
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)染料法熒光定量PCR試劑盒
染料法
50次
2490元
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)探針法熒光定量PCR試劑盒
探針法
50次
3490元
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn):
因此快速靈敏檢測(cè)綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體),與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒規(guī)格及成分:
成分
編號(hào)
十孔盒包裝
PCR MagicMix 3.0
1
1 mL(紅蓋)
超純水
2
1 mL(亮黃色)
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體) PCR 引物混合液
3
100 μL(白蓋)
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體) PCR 陽性對(duì)照(1×10E8 拷貝/μL)
4
50 μL(黃蓋)
核酸釋放劑(試用裝)
5
20 次(1 mL,綠蓋)
使用手冊(cè)
6
1 份
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:樣品 DNA。
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR試劑盒使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊(cè)可以從本公司網(wǎng)站訂購(gòu)核酸釋放劑。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體) PCR 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:
成分
N+2 個(gè)樣品管
PCR 陰性對(duì)照
PCR 陽性對(duì)照
PCR MagicMix 3.0
各 20 μL
20 μL
20 μL
綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR引物混合液
各 2 μL
2 μL
2 μL
N+2 個(gè)樣品 DNA 模板
各 18 μL
--
--
PCR 陰性對(duì)照(水)
--
18 μL
--
PCR 陽性對(duì)照(綿羊附紅細(xì)胞體(綿羊嗜血支原體)PCR 陽性對(duì)照的 1000倍稀釋液)
--
--
18 μL
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程
溫度
時(shí)間
預(yù)變性
95℃
5 min
PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán))
95℃
15 sec
57℃
15 sec
72℃
40 sec
最后延伸
72℃
10 min
三、電泳檢測(cè)
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對(duì)照必須有預(yù)期條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
PCR常見問題的常見原因
1. cDNA產(chǎn)量的很低可能的原因:
1) RNA模板質(zhì)量低
2)對(duì)mRNA濃度估計(jì)過高
3) 反應(yīng)體系中存在反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑或反轉(zhuǎn)錄酶量不足
4) 同位素磷32過期
5) 反應(yīng)體積過大,不應(yīng)超過50μl
2. 擴(kuò)增產(chǎn)物在電泳分析時(shí)沒有條帶或條帶很淺
1) 最常見的原因在于您的反應(yīng)體系是PCR的反應(yīng)體系而不是RT-PCR的反應(yīng)體系
2)與反應(yīng)起始時(shí)RNA的總量及純度有關(guān)
3)建議在試驗(yàn)中加入對(duì)照RNA
4)鏈的反應(yīng)產(chǎn)物在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),在總的反應(yīng)體系中的含量不要超過1/10
5)建議用Oligo(dT)或隨機(jī)引物代替基因特異性引物(GSP)用于鏈合成。由于RNA模板存在二級(jí)結(jié)構(gòu),如環(huán)狀結(jié)果,有可能導(dǎo)致GSP無法與模板退火;或SSⅡ反轉(zhuǎn)錄酶無法從此引物進(jìn)行有效延伸。
6)目的mRNA中含有強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄中止位點(diǎn),可以試用以下方法解決:
a. 將鏈的反應(yīng)溫度提高至50℃。
b. 使用隨機(jī)六聚體代替Oligo(dT)進(jìn)行鏈反應(yīng)。
3. 產(chǎn)生非特異性條帶
1) 用RT陰性對(duì)照檢測(cè)是否被基因組DNA污染。如果RT陰性對(duì)照的PCR結(jié)果也顯示同樣條帶,則需要用DNase I重新處理樣品。
2) 在PCR反應(yīng)中,非特異的起始擴(kuò)增將導(dǎo)致產(chǎn)生非特異性結(jié)果。在低于引物Tm 2至5℃的溫度下進(jìn)行退火,降低鎂離子或是目的DNA的量將減少非特異性結(jié)果的產(chǎn)生。
3) 由于mRNA剪切方式的不同,根據(jù)選擇引物的不同將導(dǎo)致產(chǎn)生不同的RT-PCR結(jié)果。
4. 產(chǎn)生彌散(smear)條帶
1) 在PCR反應(yīng)體系中鏈產(chǎn)物的含量過高
2) 減少引物的用量
3) 優(yōu)化PCR反應(yīng)條件/減少PCR的循環(huán)次數(shù)
4) 在用DNase處理被DNA污染的RNA樣品時(shí),其產(chǎn)生的寡核苷酸片段會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增,一般會(huì)顯示為彌散背景。
5. 產(chǎn)生大分子量的彌散條帶
1) 大多數(shù)情況下是由于退火溫度過低而導(dǎo)致的非特異性的起始及延伸產(chǎn)生的
2) 對(duì)于長(zhǎng)片段的PCR,建議將反應(yīng)體系中cDNA的濃度稀釋至1:10(或1:100-1:200)
6. 在無反轉(zhuǎn)錄酶的情況下,對(duì)照RNA獲得擴(kuò)增結(jié)果
成立日期 | 2015-05-29 (10年) | 注冊(cè)資本 | 100萬元整 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 中間體,化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
|
2024-12-24 | |
¥3490 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2024-12-23 | |
¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
|
2024-12-24 | |
¥2490 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2024-12-23 |