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檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-2抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-2與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、IL-2檢測抗體、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:3.24 pg/mL
檢測范圍: 15.6 - 1,000 pg/mL
回收率范圍:83%-106%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
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背景:
人白細(xì)胞介素2(IL-2),又稱為T細(xì)胞生長因子(TCGF),是一個(gè)分子量為15-18 kDa的具有不同糖基化的α-螺旋多肽,屬于常見的γ鏈(γc)細(xì)胞因子家族成員。它以單體存在,半衰期很短(<30 min)。人IL-2的前體有153個(gè)氨基酸,其中包含一個(gè)20個(gè)氨基酸的信號序列,和一個(gè)133個(gè)氨基酸的成熟多肽。IL-2成熟蛋白包含一個(gè)在3位蘇氨酸可O型糖基化的位點(diǎn)和三個(gè)半胱氨酸,其中的兩個(gè)半胱氨酸所形成的鏈內(nèi)二硫鍵是IL-2活性所必不可少的。成熟的人IL-2氨基酸序列與犬、大鼠、貓和獼猴的IL-2同源性分別為73%、66%、78%和97%。雖然人IL-2與高度多態(tài)的小鼠IL-2僅有60%的氨基酸同源性,但人IL-2 對小鼠細(xì)胞也具有生物活性。據(jù)報(bào)道分泌IL-2的細(xì)胞包括γδ T細(xì)胞、活化的常規(guī)CD4+和 CD8+ T細(xì)胞、神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞、造血干細(xì)胞。
IL-2受體(IL-2R)由三個(gè)亞基構(gòu)成,即一個(gè)55 kDa的CD25/IL-2Rα鏈、一個(gè)70 kDa的CD122/IL-2Rβ鏈,以及一個(gè)65 kDa的CD132/γc鏈。IL-2先與CD25結(jié)合,形成的二亞基復(fù)合物再招募CD122和CD132,形成具有四個(gè)亞基的信號復(fù)合物。除了能與IL-2形成復(fù)合物,CD122/IL-2Rβ也可同IL-15形成四亞基信號復(fù)合物。CD132/?c亦可成為IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21信號的受體。
體外研究表明,IL-2在T細(xì)胞活化和擴(kuò)增中起重要作用。在體內(nèi),IL-2是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)發(fā)育、維持和功能的關(guān)鍵,而調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞可為自身免疫性疾病提供保護(hù)。此外,IL-2也可通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞販運(yùn)基因的表達(dá)和Th2型細(xì)胞因子的產(chǎn)生,從而促進(jìn)其靶器官自身免疫性炎癥。在CD8+ T細(xì)胞亞群中,IL-2是獲得一級反應(yīng)和分化到終端效應(yīng)細(xì)胞的必要關(guān)鍵。IL-2也促進(jìn)了CD8+ T細(xì)胞的發(fā)育和激活成為記憶細(xì)胞。
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