emfret特約一級(jí)代理

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德國(guó)一家主營(yíng)二抗的公司，小鼠方面有世界專利，銷售全球，很有實(shí)力的公司
jaq1 -分析GPVI綜合抗體
jaq1單克隆抗體與血小板膠原受體GPVI的反應(yīng)。一方面，它能抑制膠原誘導(dǎo)的小鼠血小板聚集，而交聯(lián)的jaq1次級(jí)抗體誘導(dǎo)的血小板活化和聚集。
jaq1可用于免疫沉淀法、丙酮固定的冰凍切片免疫組化分析，免疫熒光染色，而非還原條件下的免疫印跡分析。
小鼠血小板表面糖蛋白的流式細(xì)胞術(shù)分析
-稀釋或洗滌全血的制備
-洗滌小鼠血小板的制備
血小板表面糖蛋白表達(dá)的單色分析
血小板活化的雙色分析
Immunohistochemistry（丙酮固定冰凍切片）
免疫共沉淀
免疫印跡（免疫印跡分析）
小鼠血小板表面糖蛋白的流式細(xì)胞術(shù)分析
頂部
緩沖液和試劑
Tris緩沖生理鹽水/肝素（TBS / HEP）：20 mm三/鹽酸；氯化鈉137毫米；pH值為7.3；含20 U/mL肝素。
磷酸鹽緩沖液（PBS）：氯化鈉137毫米；2.7毫米；1.5毫米8毫米磷酸二氫鉀；磷酸氫二鈉；pH值為7.14。
臺(tái)氏液（修改）：氯化鈉134毫米；0.34毫米2.9毫米鈉；碳酸氫鈉；12毫米；20毫米hepes；pH值為7；5毫米葡萄糖；0.35%（W/V）牛血清白蛋白
Apyrase：10 U／ml的股票在h2obidest（存儲(chǔ)在20°C）
前列環(huán)素（前列腺素2，PGI2）：1毫米的股票在h2obidest（存儲(chǔ)在20°C）
氯化鈣：1米的股票在h2obidest
頂部
稀釋或洗滌全血的制備
50μL血液肝素化玻璃毛細(xì)管（例如ringcap）從眼眶后靜脈注入1.5毫升管含有200μL TBS /肝素（20 U / ml）。
在′稀流的緩沖區(qū)，使用流式細(xì)胞儀分析1毫升。
準(zhǔn)備洗血，離心稀釋血在900 x g 5分鐘，去上清，懸浮顆粒在1.25 mL灌流′緩沖。
在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前直接添加1毫米氯化鈣。
注意：對(duì)于凝血酶誘導(dǎo)的血小板活化，血漿必須除去，以防止凝血酶活性。
頂部
洗滌小鼠血小板的制備
沖洗血小板的制備是一種耗費(fèi)時(shí)間較多的方法，需要大量的血液，但產(chǎn)生的血小板制劑可以使用幾個(gè)小時(shí)。
收集0.5 - 1毫升血液1.5厘米的玻璃毛細(xì)管從眼眶叢成1.5毫升管含有200μL TBS /肝素（20 U / ml）。
離心樣品5分鐘，每次500克，然后將富含血小板的血漿（PRP）輸送到新的試管中。為了獲得的血小板恢復(fù)，采取包括紅細(xì)胞在內(nèi)的全白相。
將血小板懸液離心8分鐘，在300×g，然后把沒(méi)有任何紅細(xì)胞的PRP移植到新的試管中。
添加0.5μ前列環(huán)素（PGI2）和M 1300 x g離心5分鐘。
血小板顆粒懸浮在1毫升Tyrode的緩沖液，加入0.02 U / ml和0.5μapyrase M前列環(huán)素，孵育5 min 37°C，并在1300 x g離心5 min
重復(fù)步驟5和血小板顆粒懸浮在0.5毫升的臺(tái)氏緩沖液，加入0.02 U /毫升apyrase培育30分鐘在37°C.
頂部
血小板表面糖蛋白的單色分析
結(jié)合5μL的特異性或陰性對(duì)照抗體和25μl稀釋整體或洗1-2秒，渦旋混合法管血。
孵育15分鐘室溫。
停止反應(yīng)，400μL PBS和分析在30分鐘之內(nèi)。
樣品孵育用FITC標(biāo)記的IgG（黑線），抗GPVI、或抗GPV的描述。血小板門(mén)控正向（FSC）/側(cè)散射（SSC）的特點(diǎn)。熒光1（FL1）的門(mén)控強(qiáng)度（R1）的血小板在單獨(dú)的直方圖顯示。紅細(xì)胞。
頂部
血小板活化的雙色分析
添加5μ具體的或負(fù)的檢測(cè)管與5μl泛血小板標(biāo)記抗體控制。
在這一點(diǎn)上，任何額外的試劑（如抑制劑）是在小體積的增加（＜5μL）。
添加26μl稀釋整體或洗血或洗滌血小板（100萬(wàn)）和渦流混合1-2秒。
孵育15分鐘室溫。停止反應(yīng)，400μL PBS和分析在30分鐘之內(nèi)。
洗滌后的小鼠血小板與PBS（靜息）或凝血酶（0.1 U / ml）結(jié)合FITC和PE共軛單克隆抗體孵育。血小板是由GPIX或GPIIbIIIa表達(dá)門(mén)控（FL1；門(mén)1）。
頂部
Immunohistochemistry（丙酮固定冰凍切片）
請(qǐng)注意：不建議在（對(duì)-）甲醛固定樣品上進(jìn)行免疫染色，因?yàn)榇蠖鄶?shù)鼠抗體在這些條件下對(duì)小鼠組織只產(chǎn)生很差的結(jié)果。
冰凍組織切片和幻燈片固定在冰冷的100%丙酮在4°C.干標(biāo)本在晚上在RT. 20分鐘為了使試劑體積減到最小，可以用防水筆在幻燈片上的紙巾部分周圍畫(huà)一個(gè)疏水環(huán)。在所有后續(xù)程序中，這個(gè)環(huán)繞的區(qū)域不應(yīng)該干涸。因此，建議在潮濕的盒子中進(jìn)行孵化步驟。
在PBS孵育20 min的幻燈片
當(dāng)用過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二次抗體，室溫孵育10分鐘，用0.03%的H2O2抑制內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。在PBS中沖洗三次，每次洗滌5分鐘。
幻燈片1小時(shí)孵化室溫封閉解
ILF3 Antibody?? ?Enabled
Streptococcus Group B Antibody?? ?Enabled
Apolipoprotein A1 Antibody (HRP)?? ?Enabled
IKZF5 Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
HIF3A Antibody?? ?Enabled
CD36 ?Antibody?? ?Enabled
Anti-NCOA3 Antibody?? ?Enabled
Fibrinogen Antibody?? ?Enabled
Rat CD49d Antibody?? ?Enabled
C18orf10 Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
BTD Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
ARHGEF9 Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
GPT Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
Thyroid Stimulating Hormone Receptor Antibody?? ?Enabled
CD9 Antibody?? ?Enabled
FIBRINOPEPTIDE A?? ?Enabled
HDAC1 Antibody?? ?Enabled
CD8 Antibody (Biotin)?? ?Enabled
SREBP-1, Antibody?? ?Enabled
CD62L Antibody?? ?Enabled
CLTB Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
Influenza A Antibody (FITC)?? ?Enabled
Anti- G Protein-Coupled Receptor LGR6 Antibody?? ?Enabled
EPCAM ?Antibody?? ?Enabled
SLU7 Over-expression Lysate Product?? ?Enabled
IgG F(Ab')2 Antibody (Alk Phos)?? ?Enabled
Staphylococcus aureus Antibody?? ?Enabled
KHDRBS3 Antibody?? ?Enabled
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