產(chǎn)品簡介

軟骨組織由軟骨細(xì)胞和軟骨基質(zhì)組成，軟骨組織及其周圍的軟骨膜構(gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅O法等。

改良番紅O-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而呈綠色或藍(lán)色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明，從而將軟骨組織與骨組織區(qū)分開。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當(dāng)軟骨受到損傷時，軟骨中的糖蛋白會釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導(dǎo)致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析，固綠與膠原纖維結(jié)合，不宜褪色，番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度易導(dǎo)致切片不著色，分化不足易導(dǎo)致切片著色過深。

自備材料：10%福爾馬林固定液，脫鈣液，蒸餾水，系列乙醇。

操作步驟(僅供參考)：

1、 標(biāo)本的處理：10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。

2、 常規(guī)脫蠟至水。

3、 入新鮮配制的 Weigert 染液染色 3-5min，水洗。

4、 酸性分化液分化 15s。

5、 蒸餾水洗 10min。

6、 在固綠染色液內(nèi)浸染 5min。

7、 快速用弱酸溶液洗滌切片 10-15s，以便去除殘留的固綠。

8、 入 Safranin O stain 內(nèi)浸染 5min。

9、 分別用 95%乙醇、無水乙醇脫水。

10、二甲苯透明，光學(xué)樹脂封固。

染色結(jié)果

軟骨基質(zhì)>>深紅色

軟骨細(xì)胞核>>藍(lán)色

細(xì)胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈>>灰綠色

軟骨細(xì)胞漿>>紅色

細(xì)胞核>>灰黑色

注意事項

1、需要顯示細(xì)胞核時，盡量采用鐵蘇木素染色，其著色力強(qiáng)色調(diào)濃，一般的蘇木素著色力不強(qiáng)。

2、Weigert 染液不可預(yù)先配制后放置，配制好后一般 24h 后失去染色力。

3、切片在 Safranin O stain 中染色不宜過長，否則易導(dǎo)致背景的深紅色不易分化掉。

4、切片分化時間應(yīng)恰當(dāng)，以背景呈綠色為宜。

5、Safranin O stain 染色后，不宜在低濃度乙醇脫水，否則易褪色。

6、95%乙醇脫水時間不宜過長。

7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。