(1)將培養(yǎng)24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌,作涂片、干燥、固定。 (2)滴加3—5滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。 (3)用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸干,必要時可添加少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4—5分鐘。這一步也可不加熱,改用飽和的孔雀綠水溶液(約7.6%)染10分鐘。 (4)傾去染液,待玻片冷卻后水洗至孔雀綠不再褪色為止。 (5)用番紅水溶液復染1分鐘,水洗至水為無色。 (6)待干燥后,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色
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